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BHQ黑洞淬滅劑+全波段熒光染料,多重qPCR的左膀右臂

版權所有,轉載請聯系基因市場部
2018-11-28

光污染,又稱光害,是人類過度使用照明系統而產生的問題。最顯而易見的影響是城市里夜空的星星被眾多大廈的燈光所覆蓋而消失了。這使得觀察宇宙的研究受到影響,而且亦破壞了生態平衡。             ---《維基百科》

 

 

  其實,除了日常生活,在qPCR試驗中也存在光污染問題!

qPCR,又稱熒光定量PCR,通過在特異的探針兩端分別標記熒光基團和淬滅基團,再依靠淬滅基團對熒光基團的作用--淬滅或釋放熒光基團--來達到對DNA或RNA進行準確定量的目的。

https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_png/LKU1F0MmURogZSuCju72ibCDtvvquJScfdc5rggvBATrUFr70zJpmPOxibEaymgPmkMr1vVTYnPDuLmvzjJbVt1w/640?wx_fmt=png

如果將細胞比喻成漫無邊際的黑夜,探針無疑就是黑夜中的啟明燈,報告基團是燈泡,特異性的序列是向導,指引靶向基因的位置,而淬滅基團就是這盞燈的開關,決定燈什么時候關閉,什么時候點亮。

 

對目標物準確的指引與定量,除了向導(序列)的特異性,還決定于開關的好壞(淬滅基團的淬滅效率 ),優質的開關,關閉的時候所有燈都會熄滅,而不夠靈敏的開關,關閉的時候不能將所有燈光熄滅,這樣殘留的燈光就會對目標物的尋找造成干擾,導致假陽性或假陰性的產生。

 

所以,有時候,當你用qPCR檢測不到目標基因的表達或結果不準確時,也許并不是探針或引物的特異性出現了問題,也不是酶出現了問題,僅僅是因為選擇的熒光淬滅基團不理想,淬滅效果不好,熒光污染導致真正的熒光信號被掩蓋或削弱了

 

BHQ---真正的黑洞淬滅劑,Biosearch專利技術,qPCR及SNP分型的福音

為了解決qPCR實驗體系中光污染的問題,最大化提高熒光信號的信噪比,基因有限公司代理的 Biosearch Technologies研發了一款專利的熒光淬滅劑---Black Hole Quencher?(BHQ)淬滅劑,該淬滅劑就像一個黑洞,能夠將一定距離內熒光基團發出的光全部吸收,真正實現對熒光信號的100%淬滅。且吸收光譜范圍廣,從430nm到近紅外光,可搭配使用的熒光基團種類多,特別適合用在多重熒光定量PCR中,目前BHQ淬滅試劑已成為高效熒光探針設計與合成的工業生產標準。

 

https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_png/LKU1F0MmURogZSuCju72ibCDtvvquJScflVSaQZng0oSgMWa3kIu5gppErH9lfeCMBMPfxib7BVBpPjt6pYIP3Qg/640?wx_fmt=png

BHQ 430nm到730nm近紅外光區前所未有的熒光淬滅光譜

 

針對近年來肆虐的寨卡、登革熱、基孔肯雅以及西尼羅河病毒,美國FDA20178月推出了一個通吃的檢測試劑盒:CII-ArboViroPlex rRT-PCR assay[PX1] 

 

盡管名字看起來十分復雜,但它的本質就是一個多重熒光定量PCR試劑盒而已。其高端之處在于:它的檢測重數高達5重,能實現5色熒光定量PCR檢測!

常規的實驗室里,做2PCR檢測時就已經面臨了串色的問題,更不用說5重。

這個試劑盒如何做到5重檢測而不串色?

仔細研究發現,它在熒光選擇上下足了功夫:

① CAL Fluor Red 610 for ZIKV

② CAL Fluor Orange 560 for DENV

③ FAM for CHIKV

④ Quasar 670 for WNV

⑤ Quasar 705 for RNase P

其中CAL Fluor Red 610 CAL Fluor Orange 560Quasar 670Quasar 705都是LGC Biosearch公司的專利染料。他們的發射光峰差距大,可以顯著的降低彼此間的干擾,從而從最根本保證了5重檢測的可能性。

 

CAL Fluor?和Quasar?熒光染料的發射光譜跨越可見光和近紅外光譜,是多重實時qPCR的理想選擇。


實際上,Biosearch公司的熒光染料還遠不止這些,真正做到了全波段覆蓋!

 

 

Q1

細心的你可能會問:5種熒光染料聚在一起,背景信號會不會特別的恐怖?

                                                                                                                                                ——用BHQ啊!https://res.wx.qq.com/mpres/htmledition/images/icon/common/emotion_panel/smiley/smiley_79.png

 

除了高效率的熒光淬滅染料和多種樣式的專利熒光染料, Biosearch Technologies還提供在線探針設計工具https://www.biosearchtech.com/support/tools/design-software/realtimedesign-software熒光基團光譜選擇工具http://qpcrdesign.com/spectral-overlay),完全不用擔心多重熒光定量PCR引物和探針設計麻煩,真正做到省心、省錢、省時間!

 

熒光基團光譜選擇工具在線界面:

 

https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_png/LKU1F0MmURogZSuCju72ibCDtvvquJScfrDxsP04dqQDEvQiapRxWdGNZ4NhofSyXfXhthlfW4NuevGgANSicxJEw/640?wx_fmt=png

 

 

Biosearch Technologies----熒光引物/探針設計與合成的全球領導者

 

Biosearch Technologies是專業性熒光定量PCR探針合成及標記服務公司,提供與世界上各種熒光定量PCR儀配套的探針標記方式及熒光素。

 

創始人Ron Cook及諾貝爾得主Kary Mullis(PCR發明者)共同發明了Biosearch SAM I寡核苷酸合成器,合成了世界上首個PCR引物。 自Real-time PCR于上世紀90年代出現后,Biosearch的科學家們先后研發了被業界視為標準的Black Hole Quencher?(BHQ)黑洞淬滅劑及專利的CALFluor?和Quasar? 系列染料。

 

Biosearch擁有豐富的高品質產品線,不僅包括探針和引物產品,廣泛應用于藥物研發,基因組測序/SNP檢測/基因表達分析等領域,也為其他寡核苷酸生產廠商提供核酸合成原材料。包括多種熒光染料和淬滅染料BHQ、具有高表面積電位的CPG支持載體和合成柱、用于寡核苷酸合成和色譜應用的化學活化的多孔玻璃,以及合成及純化配件等。



基因有限公司為 Biosearch Technologies授權一級代理,想進一步了解更詳細的產品信息,敬請留言或直接聯系基因有限公司~


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